冷冻消融联合养肺方对小鼠肿瘤生长的影响及其分子机制

随着医学技术的不断进步，治疗非小细胞肺癌（NSCLC）的方法也在不断发展。本文将介绍一种新兴的治疗方法——冷冻消融联合养肺方，探讨其对Lewis肺癌小鼠模型肿瘤生长的影响及其分子机制。

冷冻消融治疗原理

冷冻消融是一种物理治疗手段，通过冷冻技术使肿瘤细胞迅速结冰和坏死。该方法具有创伤小、恢复快的优点，适用于局部肿瘤的控制。

养肺方的活性成分分析

在传统医学中，养肺方被认为具有调节肺功能的作用。通过对养肺方的超高效液相色谱/质谱联用技术（UPLC/MS）分析，发现其主要活性成分为萜类化合物、黄酮类化合物和醛类化合物，这些成分可能对抗肿瘤有潜在的积极作用。

小鼠模型的建立及实验设计

本研究选取SPF级C57BL/6小鼠建立Lewis肺癌模型，并随机分为模型组、冷冻消融组、冷冻消融+顺铂组和冷冻消融+养肺方低、中、高剂量组。模型组仅进行假手术，而冷冻消融+顺铂组和冷冻消融+养肺方组在冷冻消融手术后分别接受顺铂或不同剂量的养肺方灌胃治疗，连续14天。

肿瘤生长的影响

结果显示，冷冻消融+养肺方低、中、高剂量组及冷冻消融+顺铂组的小鼠肿瘤体积和肿瘤质量均明显减少（P<0.05），说明冷冻消融联合养肺方能显著抑制肿瘤的生长。

肿瘤组织的形态与细胞增殖

通过HE染色观察肿瘤组织形态，发现冷冻消融+养肺方能破坏肿瘤组织结构，免疫组化检测结果显示，Ki-67蛋白表达降低，表明细胞增殖受到抑制。

全转录组测序及分子机制

全转录组测序分析揭示了冷冻消融联合养肺方干预后肿瘤组织差异表达基因，涉及1,585个基因，包括mRNA、lncRNA、miRNA和circRNA。GO和KEGG通路富集分析表明，这些差异表达基因主要涉及免疫系统反应、细胞增殖等生物过程，以及PI3K-Akt信号通路、Th17细胞分化等癌症相关通路。

ceRNA网络构建与验证

通过构建lncRNA和circRNA介导的ceRNA网络，进一步探讨了基因表达调控的复杂性。RT-qPCR验证了14个差异表达基因，与测序结果一致，进一步证实了冷冻消融联合养肺方的分子机制。

结论

综上所述，冷冻消融联合养肺方对Lewis肺癌小鼠模型具有显著的肿瘤生长抑制作用，其机制可能涉及调控Gm38393/miRNA-136-5p/Zfp704轴。这一发现为非小细胞肺癌的综合治疗提供了新的视角和策略，未来有望进一步转化为临床应用，为患者带来更多的治疗选择。

李晓东

保定市第一中心医院总院