过表达miR-203a-3p抑制P65-GLS1促肝癌细胞凋亡

过表达miR-203a-3p抑制P65-GLS1促肝癌细胞凋亡

肝癌作为一种常见的实体肿瘤，其发病机制复杂，治疗难度较大。近年来，分子生物学的进展为肝癌的研究提供了新的视角，尤其是非编码RNA在肿瘤发生发展中的作用备受关注。miR-203a-3p作为一种重要的微小RNA，已被发现参与多种肿瘤的调控过程。本文旨在探讨miR-203a-3p通过调控P65-GLS1信号通路对肝癌细胞周期及免疫逃逸的影响，揭示其在肝癌治疗中的潜在价值。

一、肝癌的分子机制及miR-203a-3p的作用背景

肝癌的发生通常伴随着细胞周期失控和免疫逃逸现象。细胞周期的异常促进肿瘤细胞的无限增殖，而免疫逃逸则使肿瘤细胞能够躲避免疫系统的监视，导致疾病进展。NF-κB信号通路是调控细胞增殖、凋亡及免疫反应的重要通路，其中的P65亚单位（NF-κBp65）在肿瘤细胞中常表现为异常激活。GLS1作为谷氨酰胺代谢的关键酶，也被发现与肿瘤细胞的代谢重编程和生存密切相关。miR-203a-3p通过靶向调控这些关键分子，可能在肝癌细胞的生物学行为中发挥重要作用。

二、miR-203a-3p在肝癌细胞中的表达及功能研究

通过qRT-PCR技术检测发现，与正常肝上皮细胞L02相比，人肝癌细胞株Bel-7402、HepG2及MHCC97H中miR-203a-3p的表达显著降低，提示其可能具有抑癌作用。进一步实验中，将HepG2细胞分为肝癌组、miR-203a-3p-siRNA组、miR-203a-3p-mimics组及对照组，采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率和细胞周期分布。结果显示，过表达miR-203a-3p（mimics组）显著促进肝癌细胞凋亡，延长G1期，缩短G2期，表明miR-203a-3p能够抑制细胞周期进程，阻止细胞过度增殖。

三、miR-203a-3p对免疫逃逸相关蛋白及信号通路的调控

免疫逃逸是肿瘤细胞逃避免疫系统攻击的关键机制。CD46、CD55和CD59是细胞膜上的补体调节蛋白，能够保护肿瘤细胞免受补体介导的细胞溶解。免疫印迹实验显示，miR-203a-3p过表达显著抑制这三种蛋白的表达，提示其可能通过降低补体调节蛋白水平，增强肿瘤细胞对免疫系统的敏感性。此外，miR-203a-3p还抑制了NF-κB、NF-κBp65及GLS1蛋白的表达，表明其能够干预肿瘤细胞的信号传导和代谢活动。

荧光素酶报告基因实验进一步证实，miR-203a-3p能够靶向结合NF-κBp65及GLS1的3′非翻译区（3′UTR），直接调控其表达水平。Pearson相关性分析显示，miR-203a-3p与NF-κBp65及GLS1的表达呈显著负相关，支持其作为负调控因子的作用。

四、miR-203a-3p调控肝癌细胞周期及免疫逃逸的机制探讨

miR-203a-3p通过靶向抑制NF-κBp65，阻断了NF-κB信号通路的激活，进而影响细胞周期调控基因的表达，导致细胞周期停滞和凋亡增加。同时，抑制GLS1表达干扰了肿瘤细胞的谷氨酰胺代谢，削弱了其能量供应和生存能力。通过降低CD46、CD55和CD59的表达，miR-203a-3p增强了肿瘤细胞对免疫系统的敏感性，减弱了免疫逃逸现象。这些作用共同促进了肝癌细胞的凋亡，抑制了其增殖和免疫逃逸能力。

五、结语

本研究揭示了miR-203a-3p在肝癌细胞中的抑癌作用，特别是其通过调控P65-GLS1信号通路影响细胞周期和免疫逃逸的机制。过表达miR-203a-3p不仅促进肝癌细胞凋亡，还改善了肿瘤细胞的免疫逃逸状态，为肝癌的分子靶向治疗提供了新的思路。未来，针对miR-203a-3p及其靶点的研究有望推动肝癌治疗策略的创新，提升患者的治疗效果和生存质量。

罗允周

陆军军医大学第一附属医院