全转录组学分析揭示冷冻消融联合养肺方治疗肺癌的分子机制

非小细胞肺癌（NSCLC）作为全球致死率最高的癌症之一，对患者的生命健康造成了严重威胁。近年来，冷冻消融技术联合中药养肺方治疗NSCLC显示出了一定的疗效，但其作用机制尚未完全明确。本研究旨在通过全转录组学分析，探讨冷冻消融联合养肺方治疗NSCLC的疗效及其作用机制。

首先，本研究利用超高效液相色谱/质谱联用技术（UPLC/MS）对养肺方的主要活性成分进行了鉴定，结果表明，养肺方主要含有萜类化合物、黄酮类化合物和醛类化合物。这些活性成分可能对肺癌细胞具有直接或间接的抑制作用。

接着，研究者通过建立Lewis肺癌模型的小鼠，将小鼠随机分为模型组、冷冻消融组、冷冻消融+顺铂组和冷冻消融+养肺方低、中、高剂量组。通过对比各组小鼠的肿瘤体积和肿瘤质量，发现冷冻消融联合养肺方治疗能够显著减少肿瘤体积和质量，与模型组相比具有统计学差异（P<0.05）。此外，通过HE染色观察肿瘤组织形态，发现冷冻消融联合养肺方能够破坏肿瘤组织结构，并通过免疫组化检测发现该疗法能够抑制肿瘤组织中Ki-67蛋白的表达，从而抑制细胞增殖。

全转录组测序分析结果显示，冷冻消融联合养肺方干预后肿瘤组织中存在1585个差异表达基因，包括1160个mRNA、225个lncRNA、155个miRNA和45个circRNA。通过GO富集分析发现，这些差异表达基因主要涉及免疫系统反应、细胞增殖等生物过程，蛋白质复合物、细胞连接等细胞组分，以及转录调节活性、分子功能调节器等分子功能。KEGG通路富集分析表明，这些差异表达基因主要富集在PI3K-Akt信号通路、Th17细胞分化、mTOR信号通路、FOXO信号通路等与癌症相关的通路。

进一步构建了lncRNA/circRNA介导的ceRNA网络，发现由97个lncRNA、73个miRNA和417个mRNA组成的lncRNA介导的ceRNA网络，以及由26个circRNA、68个miRNA和157个mRNA组成的circRNA介导的ceRNA网络，可能在冷冻消融联合养肺方治疗NSCLC中发挥重要作用。通过RT-qPCR验证了14个差异表达基因，其表达结果与测序结果一致。

综上所述，冷冻消融联合养肺方治疗能够抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤的生长，破坏肿瘤组织结构，并抑制细胞增殖。其作用机制可能与调控Gm38393/miRNA-136-5p/Zfp704轴有关。本研究为冷冻消融联合中药治疗NSCLC提供了分子层面的证据，有望为NSCLC的综合治疗提供新的思路和方法。然而，这些发现还需要进一步的临床研究来验证其在人类患者中的有效性和安全性。

马鑫

巴中市中医院回风院区