鳖甲煎丸抑制肝癌细胞的环状RNA表达谱分析

鳖甲煎丸对肝癌细胞环状RNA表达谱的影响分析

在对抗肝癌的战役中，中医药正发挥着越来越重要的作用。本研究聚焦于传统中药方剂鳖甲煎丸，旨在深入探索其抑制肝癌细胞进展的分子机制，特别是其对环状RNA（circRNA）表达谱的影响。通过一系列实验，我们试图揭示鳖甲煎丸如何通过调控circRNA的表达，进而影响肝癌细胞的生物学行为。

一、 circRNA与肝癌

环状RNA是一类特殊的非编码RNA，它们具有环状结构，不易被RNA酶降解，因此比线性RNA更加稳定。circRNA广泛存在于真核生物细胞中，参与调控基因表达、细胞生长、分化、凋亡等多种生物学过程。近年来，越来越多的研究表明，circRNA在肿瘤的发生发展中扮演着重要角色，既可以作为癌基因促进肿瘤生长，也可以作为抑癌基因抑制肿瘤进展。因此，深入研究circRNA在肝癌中的作用机制，对于开发新的肝癌治疗策略具有重要意义。

二、 研究方法

本研究首先利用生物信息学方法，包括find_circ和CIRI算法，对circRNA的表达进行预测和鉴定。然后，通过KEGG通路和GSEA富集分析，分析差异表达的circRNA的靶基因及其参与的信号通路。为了进一步验证鳖甲煎丸的抗肝癌作用，我们设计了一系列细胞和动物实验。

在细胞实验中，我们采用彗星实验检测鳖甲煎丸含药血清对肝癌细胞DNA损伤的影响，评估其对肝癌细胞的杀伤作用。同时，通过β-半乳糖苷酶染色评估其对肝癌细胞衰老的诱导作用，以及划痕实验检测细胞迁移能力的变化，观察鳖甲煎丸对肝癌细胞生物学行为的影响。

在动物实验中，我们构建了肝癌细胞皮下移植动物模型，观察瘤体体积和生长曲线的变化，评估鳖甲煎丸在体内的抗肿瘤效果。

三、 研究结果

通过生物信息学分析，我们鉴定出2899个差异表达的circRNA。KEGG通路富集分析显示，这些circRNA的靶基因主要富集于动物自噬、脊髓小脑共济失调、内质网中的蛋白质加工和细胞衰老等信号通路。GSEA分析进一步显示，这些circRNA的靶基因在UV响应、有丝分裂纺锤体和G2/M检查点通路中显著富集，提示其可能参与调控细胞周期和DNA损伤修复。

彗星实验结果表明，鳖甲煎丸含药血清可显著诱导肝癌细胞的DNA损伤，提示其具有直接杀伤肝癌细胞的作用。β-半乳糖苷酶染色实验显示，经鳖甲煎丸干预后的肝癌细胞β-半乳糖苷酶阳性表达显著增加（P < 0.01），提示其可以诱导肝癌细胞衰老。划痕实验结果表明，干预后的肝癌细胞迁移能力在0 h和48 h之间存在显著差异（P < 0.01），提示其可以抑制肝癌细胞的转移。

小鼠模型实验结果显示，鳖甲煎丸含药血清干预后，肿瘤体积显著减小，生长曲线显著降低（P < 0.01），进一步证实了其在体内的抗肿瘤效果。

四、 结论

本研究结果表明，鳖甲煎丸通过调控circRNA的表达，诱导肝癌细胞DNA损伤和衰老，从而抑制其迁移和增殖能力，发挥抗肝癌作用。这些发现为深入理解鳖甲煎丸的抗肝癌机制提供了新的视角，也为开发新的肝癌治疗策略提供了实验依据。

本研究的意义在于，它不仅揭示了鳖甲煎丸抗肝癌作用的分子机制，也为中医药治疗肿瘤提供了新的思路。未来，我们可以进一步深入研究鳖甲煎丸调控circRNA表达的具体机制，以及circRNA在肝癌发生发展中的作用，为肝癌的精准治疗提供新的靶点和方法。

罗允周

陆军军医大学第一附属医院