甘草次酸与阿霉素协同诱导肝癌细胞凋亡的分子机制探究

肝癌作为全球范围内致死率较高的恶性肿瘤之一，其治疗一直是医学研究的重点。近年来，随着分子生物学技术的发展，人们对于肝癌细胞凋亡的分子机制有了更深入的认识。本文旨在探讨甘草次酸（GA）与阿霉素（DOX）联合应用在诱导肝癌HepG2细胞凋亡中的作用及其分子机制。

首先，我们通过体外培养HepG2细胞，采用细胞增殖毒性检测（CCK-8）法来评估细胞活力。实验结果显示，GA和DOX的联合应用显著降低了HepG2细胞的活力，这一结果提示了两者联合应用可能对肝癌细胞具有抑制作用。进一步地，我们通过流式细胞术检测了HepG2细胞的凋亡水平，发现GA和DOX联用组的细胞凋亡率显著高于单一药物处理组，这进一步证实了联合用药的协同效应。

在分子层面，我们关注了内质网与线粒体之间的相互作用。通过共定位荧光成像法，我们发现GA和DOX联用可以显著降低内质网与线粒体之间的共定位水平，这可能与细胞凋亡过程中内质网应激的增加有关。此外，我们还利用荧光探针法检测了内质网和线粒体中的Ca²⁺含量，结果显示联用组内质网中的Ca²⁺含量显著增多，而线粒体中的Ca²⁺含量显著减少，这可能与内质网应激反应和细胞凋亡信号的传递有关。

进一步的分子机制研究表明，去乙酰化酶3（SIRT3）在GA和DOX联合诱导的细胞凋亡中扮演了重要角色。通过qRT-PCR和Western blot技术，我们检测到SIRT3的mRNA和蛋白表达水平在联用组中显著升高。此外，免疫共沉淀（CO-IP）实验结果表明SIRT3与电压依赖性阴离子通道蛋白1（VDAC1）之间存在相互作用，且VDAC1的乙酰化水平在联用组中显著降低。这些结果提示SIRT3可能通过调节VDAC1的乙酰化状态来影响细胞凋亡。

值得注意的是，我们还发现VDAC1、分子伴侣葡萄糖调节蛋白75（GRP75）和1,4,5-三磷酸肌醇受体（IP3R）之间存在相互作用，且这些蛋白的相对表达量在联用组中显著降低。这些发现表明，GA和DOX可能通过调节这些蛋白之间的相互作用来影响内质网线粒体膜域结构（ERMMs）的形成，进而调节内质网和线粒体之间的Ca²⁺转运，最终诱导细胞凋亡。

综上所述，本研究揭示了甘草次酸与阿霉素联合应用在诱导肝癌HepG2细胞凋亡中的分子机制，为肝癌的治疗提供了新的策略和理论依据。通过深入研究这些分子事件，我们有望开发出更为有效的肝癌治疗药物，以提高患者的治疗效果和生存质量。

聂慧岩

太康县人民医院南院区